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浅析SEM扫描电镜生物样品制备技术

点击次数:113 发布时间:2021-10-23
  扫描电子显微镜,简称为扫描电镜,英文缩写为SEM(Scanning Electron Microscope)。它是用细聚焦的电子束轰击样品表面,通过电子与样品相互作用产生的二次电子、背散射电子等对样品表面或断口形貌进行观察和分析。SEM已广泛应用于材料、冶金、矿物、生物学等领域。
  SEM扫描电镜由电子枪、电磁透镜、扫描线圈和样品室等部件组成。作用:获得扫描电子束、作为产生物理信号的激发源。为了获得较高的信号强度和图像分辨率,扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。
  电子枪利用阴极与阳极灯丝间的高压产生高能量的电子束。目前大多数扫描电镜采用热阴极电子枪。优点:灯丝价格便宜,真空要求不高;缺点:发射效率低,发射源直径大,分辨率低。现在,高等级扫描电镜采用六硼化铺(LaB6)或场发射电子枪,二次电子像的分辨率可达到2nm。扫描电镜的分辨率与电子在试样上的小扫描范围有关。通常电压为130kV。
  SEM扫描电镜生物样品制备技术:
  常规电镜样品要求:
  必须是干燥的,不含水分或挥发性物质;
  具有一定机械强度,能耐受电子束轰击;
  具有导电性,被激发时能够产生足够的二次电子。
  生物材料特点:含水分多,质地柔软,机械强度小;组成元素的原子序数低,导电性差,激发后二次电子的产额较少。
  制样的任务:通过一系列处理,既要尽量保存材料的固有形态,又要改良其物理性能,使其适合在电镜下观察成像。
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